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用恒溫培養(yǎng)箱監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng)中的污染

更新時間:2022-03-28  |  點(diǎn)擊率:876

  大家都了解,細(xì)胞培養(yǎng)過程中難免會出現(xiàn)污染,小喆講解一下細(xì)胞污染如何鑒定。
  細(xì)胞培養(yǎng)是生物醫(yī)學(xué)研究的常見操作,其中避免細(xì)菌污染是重要一環(huán)。細(xì)胞是否干凈,直接關(guān)系到實(shí)驗結(jié)果穩(wěn)定性的好壞。
  一般情況下細(xì)胞實(shí)驗過程中出現(xiàn)的常見污染主要有:細(xì)菌污染、真菌污染和支原體污染。每種情況又分別有不同的癥狀和解決方法。
  我們將分三篇文章,簡要概述三種不同污染的癥狀及處理方法。
  細(xì)菌概述
  細(xì)菌是一種原核細(xì)胞微生物,一般為微米級別。細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌
、假單胞菌等。
  細(xì)菌污染癥狀
  與其他污染相比,細(xì)菌污染在細(xì)胞培養(yǎng)過程中“發(fā)病"更為迅速,較容易被發(fā)現(xiàn)。具體表現(xiàn)為:

  •   細(xì)胞培養(yǎng)基短期內(nèi)變黃且渾濁(大量酸性物質(zhì)累積)

  •   靜置的培養(yǎng)液時不渾濁,但稍加震蕩,就有許多渾濁物漂起

  •   可見培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒物漂浮

  •   細(xì)胞停止生長并有中毒表現(xiàn),后出現(xiàn)大量死亡

  細(xì)菌污染鑒定
  簡易方法:
  1、取少量培養(yǎng)液涂片染色檢查,憑經(jīng)驗判斷細(xì)菌種類。
  2、向肉湯培養(yǎng)基內(nèi)滴入少量培養(yǎng)液
,置電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37 ℃培養(yǎng)以檢測。

  細(xì)菌污染的祛除
  對于一般細(xì)胞:發(fā)生污染直接丟棄,并對環(huán)境進(jìn)行消殺,紫外線滅菌、消毒液擦拭電熱恒溫培養(yǎng)箱、工作臺等。

  對于重要且污染相對較輕的細(xì)胞:一般用抗生素的常用量的 5~10 倍作沖擊療法,用藥 24~48 小時后再換常規(guī)培養(yǎng)液,需要注意的是:
  一旦發(fā)生污染后再使用抗生素常常難以祛除
,有的抗生素只有抑菌作用而無殺菌效應(yīng)。
且有研究表明,大量使用抗生素,或?qū)?xì)胞基因組產(chǎn)生影響。



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