二氧化碳培養(yǎng)箱，又稱細胞培養(yǎng)箱，喆圖二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，要求穩(wěn)定的溫度37℃、穩(wěn)定的CO2水平5%、較高的相對飽和濕度（95%）來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種儀器。二氧化碳培養(yǎng)箱是開展免疫學、腫瘤學、遺傳學及生物工程所必需的關(guān)鍵設(shè)備，廣泛應用于細胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)，常見于細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)抗體、體外授精（IVF）、干細胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。

一、實驗目的

       利用二氧化碳培養(yǎng)箱模擬哺乳動物細胞生存的環(huán)境，通過收集培養(yǎng)箱內(nèi)的細胞分泌物，研究細胞在特定條件下的分泌功能，為進一步的功能研究和應用提供實驗依據(jù)。

二、實驗原理

       哺乳動物細胞在生長和繁殖過程中，會分泌各種生物活性物質(zhì)，如生長因子、激素、酶等。二氧化碳培養(yǎng)箱可以提供細胞生長所需的氣體環(huán)境（95%空氣和5%二氧化碳），維持培養(yǎng)基的pH值，有利于細胞的生長和分泌功能的維持。

三、實驗材料與儀器

       1. 材料：哺乳動物細胞系、二氧化碳培養(yǎng)箱、培養(yǎng)基、試劑、儀器等。

       2. 儀器：二氧化碳培養(yǎng)箱、細胞培養(yǎng)板、離心機、移液器、吸頭、培養(yǎng)皿、顯微鏡等。

四、實驗步驟

       1. 將哺乳動物細胞系接種到細胞培養(yǎng)板中，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)至細胞生長至適合階段。

       2. 為了研究細胞在不同條件下的分泌物變化，我們可以設(shè)置不同的實驗組，如改變培養(yǎng)基成分、調(diào)整二氧化碳濃度等。

       3. 將細胞培養(yǎng)板放回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)培養(yǎng)。期間注意觀察細胞的生長狀態(tài)，適時更換培養(yǎng)基。

       4. 培養(yǎng)至所需時間后，取出細胞培養(yǎng)板，收集培養(yǎng)箱內(nèi)的細胞分泌物。

       5. 采用離心方法分離細胞分泌物，收集上清液，分裝并標記，置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

       6. 實驗結(jié)束后，清洗細胞培養(yǎng)板，并進行消毒處理，放回二氧化碳培養(yǎng)箱中備用。

五、注意事項

         1. 在操作過程中，避免二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)的氣體環(huán)境受到污染，確保無菌操作。

         2. 定期檢查二氧化碳培養(yǎng)箱的運行狀態(tài)，確保其正常工作。

         3. 觀察細胞的生長狀態(tài)，適時更換培養(yǎng)基，保持培養(yǎng)基的新鮮度。

         4. 收集細胞分泌物時，注意避免擾動細胞，以免影響分泌物的收集。

         5. 分離細胞分泌物后，及時將上清液分裝并標記，置于-80℃冰箱保存，避免反復凍融。

         6. 實驗結(jié)束后，及時清洗和消毒細胞培養(yǎng)板，確保實驗設(shè)備的正常使用。

六、實驗結(jié)果與分析

       通過二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)哺乳動物細胞，并收集細胞分泌物，可以獲得富含生物活性物質(zhì)的樣本。將這些樣本進行后續(xù)的實驗研究，如分析分泌物的成分、功能等，可以為細胞生物學研究、藥物研發(fā)等領(lǐng)域提供有價值的實驗數(shù)據(jù)。

在這個實驗中，我們可以探索細胞在不同條件下的分泌物變化，進一步了解細胞的行為和功能。同時，二氧化碳培養(yǎng)箱的使用為我們提供了一個穩(wěn)定和可控的實驗環(huán)境，使我們的實驗結(jié)果更加可靠和準確。